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    尼氏染色法操作步骤及注意事项

    发布时间: 2016-07-27  点击次数: 9754次
    尼氏染色法主要特点:操作简便染色稳定、分化时间短,适用范围广,可以用于石蜡组织切片的尼氏物质/尼氏小体、神经元等。
     
    尼氏染色法操作步骤:
    1.固定:可采用乙醇、Carnoy固定液或中性福尔马林溶液。
    2.组织切片:石蜡切片7~10μm或25μm(见注意事项4)。
    3.切片脱蜡入水。
    4.用甲基紫染色液涂片,染色10~20min。
    5.蒸馏水冲洗。
    6.用NisslDifferentiation分化4~8s,直到大部分染色被消除。
    7.直接经无水乙醇至二甲苯,显微镜下观察。
    8.如果有必要,重复步骤6和7。重复时,给予少量NissolDifferentiation分化。
    9.在二甲苯中充分冲洗。加拿大香脂或DPX封片。
     
    尼氏染色法注意事项:
    1.尼氏体离体后容易溶解,所以组织取出后应立即固定,否则难以着色。
    2.组织固定起着非常重要的作用,固定可采用乙醇、Carnoy固定液或中性福尔马林溶液。
    3.本染色液对石蜡组织切片的尼氏染色效果较好。
    4.如果要证实尼氏物质的存在,那么染色后必须要用NissolDifferentiation分化。
    5.石蜡切片厚度7~10μm或25μm(皮质神经元密度的评估要用25μm厚的切片)。
    6.染色后的标本务必避光保存,否则容易褪色。
    7.主要由甲基紫染色液、分化液等组成。尼氏物质呈紫黑蓝色,神经元呈淡紫蓝色,细胞核呈紫蓝色。
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